Hopp til innhold
 
International Parkinson and Movement Disorder Society

Tidligere, nåværende og fremtidige roller til α-synukleinfrøamplifikasjonsanalyser

DatoMai 2024
Forfattere: Omar El-Agnaf, PhD; Ilham Abdi, PhD; Nobutaka Hattori, MD, PhD, FANA; Tiago Outeiro, PhD.
Redaktører: Lorraine Kalia, lege, PhD; Daniela Berg, lege, PhD; Jeffery H. Kordower, PhD 


Introduksjon

Frøamplifiseringsanalyser (SAAer), også kjent som sanntids skjelvingsindusert konvertering (RT-QuIC) eller proteinmisfolding syklisk amplifisering (PMCA), ble opprinnelig utviklet for å påvise den smittsomme formen av prionprotein ved Creutzfeldt-Jakobs sykdom (CJD) (Figur 1).1 Med den vellykkede utviklingen av SAAs som en diagnostisk test for Creutzfeldt-Jakobssykdom,2 SAA-er ble tilpasset for deteksjon av sykdomsassosiert α-synuklein (α-syn). Noen endringer i analyseprotokollen inkluderte senking av bufferens surhetsgrad og temperatur, hvor en av de viktigste endringene var tilsetning av kuler under skjelvingsprosessen. α-Syn SAA-er rapporterte først suksess i deteksjon av aggregert α-syn hos pasienter med Lewy-legemers (DLB) demens og Parkinsons sykdom (PD) i 2016. Siden den gang har analysen blitt replikert over hele verden i håp om å forbedre sensitiviteten og spesifisiteten for deteksjon av synukleopati i ulike biofluider og vev. I 2023 var forskere som brukte en modifisert α-syn SAA de første til å rapportere differensiering mellom PD- og MSA-pasienter, noe som er et lovende neste steg for utviklingen av α-syn SAA.9 Diskusjonen nedenfor dykker dypere inn i den nåværende tilstanden til α-syn-anvendelse med innsikt fra eksperter på feltet om praktiske anvendelser, viktig utvikling og fremtidige håp for α-syn SAA-er.

Figur 1: Historisk tidslinje for utvikling av α-syn-frøamplifikasjonsanalyse.

 

 

Artikkel Oversikt

Hoppe til: 

 

Hvordan utføres SAA-er i laboratoriet, og hva måler de? Hvilket biomateriale anses for tiden som nyttig? 

Professor Outeiro:

α-Syn SAA-er utføres ved å blande humant avledet materiale med rekombinant fremstilt, monomerisk α-syn (brukt som substrat) i en 96-brønnsplate under omrøring ved 37 ºC. For tiden er cerebrospinalvæske (CSF) og blod de biomaterialene som anses som mest nyttige, men andre biomaterialer som spytt, urin, hudhomogenater, neseprøver eller avføring kan også vise seg nyttige i fremtiden, etter hvert som nye versjoner av protokollene dukker opp (Figur 2). 

Dr. El-Agnaf og Dr. Abdi:

Proteinopatier involverer patologisk aggregering av feilfoldede proteiner, som kan fungere som frø for å fremme feilfolding og aggregering av de samme native proteinene.12 Ved synukleinopati, en type proteinopati, er aggregering av α-syn-protein et kjennetegn på sykdommen. Det finnes tre hovedtyper synukleinopatier: Parkinsons sykdom, Lewy-legemedemens (DLB) og multippel systematrofi (MSA), hvor de to første hovedsakelig er en nevral synukleinopati og sistnevnte primært er en oligodendroglial synukleinopati.13

SAA-er er spesielt utviklet for å oppdage disse aggregatene med høy sensitivitet og spesifisitet. De utnytter denne såmekanismen ved å blande en liten mengde biologisk prøve som inneholder feilfoldet α-syn, eller «α-syn-frø», med et stort overskudd av deres løselige, monomere α-syn.14 Amplifiseringsprosessen involverer sykluser med inkubasjon og agitasjon eller sonikering for å fremme rask multiplikasjon av disse frøene. Denne interaksjonen forenkler amplifiseringen av de feilfoldede proteinaggregatene, noe som muliggjør deteksjon av svært lave nivåer av patologiske proteiner. Aggregeringen av α-syn overvåkes over tid, vanligvis ved å måle fluorescensintensiteten til et fargestoff, Th-T, som tilsettes og som binder seg spesifikt til de dannede amyloidfibrillene som inneholder β-arkstrukturer "aggregater". Økningen i fluorescens over tid indikerer dannelsen av α-syn-aggregater. Reaksjonskinetikken, reflektert i vekstkurven for fluorescensintensitet, kan gi informasjon om såingspotensen til de feilfoldede proteinene som er tilstede i den opprinnelige biologiske prøven. 3,15 

SAA-arbeid utført for synukleinopatier, spesielt PD, har gjort store fremskritt det siste tiåret med utviklingen av SAAer for ulike biomaterialer.5,16 Det mest brukte og informative biomaterialet er CSF på grunn av dets nære kontakt med hjernen.17 Inkluderingen av ulike biofluider og vev i SAA har vært et betydelig fokus i nyere studier, og mange har utvidet omfanget til å inkludere lukteslimhinne og hudvev, og rapportert lovende resultater som understreker analysens tilpasningsevne og potensial for å forbedre diagnostisk presisjon og bekvemmelighet.18,19 Nyere arbeid har sett på bruken av SAA ved å inkorporere et immunutfellingstrinn som isolerer det feilfoldede α-synet fra blodet først og deretter påfører det på SAA.9 

Dr. Hattori:

Den brukes til tidlig diagnose av Parkinsons sykdom og differensialdiagnose. Den mest nyttige er rettet mot generell testing, og vi mener det er viktig å måle den i blod. SAA har endelig «lagt grunnlaget for den biologiske diagnosen av Parkinsons sykdom», og den har gjort det mulig å oppdage sykdommen selv før noen kliniske eller fysiske forandringer oppdages. 9,21 Innsamling av CSF eller hudbiopsi er imidlertid mer byrdefull enn konvensjonelle testmetoder, og utvikling av blodprøver og andre mindre byrdefulle metoder kan være nødvendig for å spre bruken av α-syn SAA som en ledetråd for å oppdage PD. 

Figur 2: Skjematisk fremstilling av α-syn-frøamplifikasjonsanalysen. Laget med Biorender.com.

 

Hva er den nåværende rollen til stabiliseringsmekanismer i klinisk praksis? Hvordan bør de brukes for personer med reversibel sykdom (RBD), personer med etablert Parkinsons sykdom og personer med parkinsonisme med en diagnose?

Dr. El-Agnaf og Dr. Abdi:

SAA-er har blitt viktige verktøy i klinisk forskning på Parkinsons sykdom og relaterte lidelser. Selv om de viser stort potensial i forskningsmiljøer, har SAA-er ennå ikke oppnådd godkjenning for klinisk diagnostisk bruk. En betydelig utvikling på dette feltet er imidlertid den kommersielle tilgjengeligheten av SYNTap® Biomarker Test i USA. Denne testen, utviklet av Amprion, en pioner innen SAA-teknologi, markerer et betydelig skritt fremover i tidlig oppdagelse av Parkinsons sykdom og relaterte lidelser. Selv om den ikke er universelt godkjent for klinisk diagnostikk, har noen klinikker, som Mayo Clinic, begynt å innlemme SYNTap-testen som et supplerende verktøy i sine diagnostiske prosesser.20 Denne bruken fremhever den økende anerkjennelsen av SAAs potensial til å forbedre klinisk forståelse og pasientbehandling ved nevrodegenerative sykdommer.

Den viktige studien Parkinson's Progression Markers Initiative (PPMI) av Siderowf et al. skiller seg ut som den største analysen så langt som bruker SAA, og markerer et betydelig sprang i vår forståelse av dens diagnostiske ytelse. Studien, som involverte hele 1123 deltakere, viste en sensitivitet på 87.7 % og en spesifisitet på 96.3 % for PD, og ​​fremhevet dens rolle i å forstå sykdommens molekylære heterogenitet og identifisere prodromale individer.21

SAA-er kan være spesielt verdifulle for tidlig deteksjon av α-syn-aggregater hos individer med risiko for å utvikle synukleinopatier, som de med REM-søvnforstyrrelse (RBD) eller hyposmi, noe flere studier har vist.21-24 Tidlig identifisering av disse aggregatene kan bidra til å stratifisere risikonivåer for utvikling av PD eller relaterte lidelser, og dermed legge til rette for nærmere overvåking og tidlige intervensjonsstrategier. PPMI-studien fremhevet SAAs evne til å skille PD fra friske kontrollpersoner og ytterligere forbedre diagnosen blant de med parkinsonismesymptomer, inkludert de med og uten genetiske varianter assosiert med PD. SAA har også evnen til å skille mellom PD, DLB og MSA fra ikke-synukleinopatier i parkinsonismen, som progressiv supranukleær parese (PSP) og kortikobasal degenerasjon (CBD).25 Dette bidrar til nøyaktig diagnose og passende behandling av disse tilstandene. Ytterligere forskning og klinisk validering i mer longitudinelle og mangfoldige kohorter av nevrodegenerative lidelser er nødvendig for nøyaktig differensialdiagnose og for å forstå sykdommens underliggende patologi. Dette vil muliggjøre integrering av SAA-er i rutinemessig klinisk praksis og gi kritisk veiledning for behandlingsbeslutninger.

Professor Outeiro:

SAA-er er verdifulle for å bestemme tilstedeværelsen av såingsevne hos individer. Ifølge nyere data ser det ut til at RBD-individer allerede viser SAA-positive signaler, selv om de ikke viser kliniske trekk ved motorfasen til PD. SAA-er kan være svært nyttige for å klassifisere individer i henhold til deres α-syn-status.

Dr. Hattori:

Når det gjelder RBD-pasienter, er det enighet om at de er en risikogruppe for synukleopati. Derfor er det viktig å verifisere hvor raskt fenokonversjon skjer etter et positivt resultat ved bruk av SAA kombinert med immunopresipitasjon. Når dette er verifisert, vil tidspunktet for tidlig intervensjon bli bestemt. Vi tror også at det hos etablerte PD-pasienter vil være mulig å bestemme forholdet mellom SAA-resultater og progresjonsraten av kliniske symptomer. Som en validert test kan den differensiere parkinsonismer, som ikke er en synukleopati. Videre vil kliniske studier som kun retter seg mot synukleopati bli realisert, og mer presisjonsmedisin vil bli realisert.

VIKTIG FORSIKTIG: SAA-er brukes for tiden i klinisk forskning og har ennå ikke blitt verifisert som et diagnostisk verktøy for prodromal PD. Se disse ressursene for mer informasjon om de etiske utfordringene ved bruk av SAA-er i klinisk praksis. 

Pasienters synspunkter på de etiske utfordringene ved tidlig oppdagelse av Parkinsons sykdom. Schaeffer E, Rogge A, Nieding K, Helmker V, Letsch C, Hauptmann B, Berg D.Neurology. 2020. mai 12;94(19):e2037-e2044. doi: 10.1212/WNL.0000000000009400.  

Risikoopplysning ved prodromal Parkinsons sykdom. Schaeffer E, Toedt I, Köhler S, Rogge A, Berg D. Mov Disord. Desember 2021;36(12):2833-2839. doi: 10.1002/mds.28723. 

 

Hva er de mest lovende utviklingene for denne metodikken i horisonten? Hva er nødvendig for å oppnå denne utviklingen?

Dr. Hattori:

Differensiering innen synukleinopati er nå mulig. Vi mener det er avgjørende å etablere en enklere testmetode, hvis mulig. Siden spesifikke synukleinfrø finnes for hver synukleinopati, kan vi også si at produksjonen av sykdomsspesifikke synukleinfrøantistoffer vil være tilgjengelig, noe som vil føre til utvikling av sykdomsspesifikke antistoffterapier. 

Dr. El-Agnaf og Dr. Abdi:

Fordelene med SAA-er er mange. De gir høyere sensitivitet sammenlignet med andre diagnostiske metoder og kan oppdage feilfoldede proteiner i tidlige sykdomsstadier, noe som potensielt kan bidra til tidligere diagnose og intervensjon.19,26 Anvendbarheten av teknikken med en rekke biologiske prøver gir også en verdifull fordel.18,19,27 Til tross for potensialet deres er SAA imidlertid ikke uten begrensninger. SAA har primært blitt brukt på en kvalitativ måte for å oppdage tilstedeværelsen av feilfoldede α-syn-aggregater, noe som genererer binære resultater av positiv eller negativ for α-syn-frø. Kvantifisering av α-syn-frø i biologiske prøver vil gi verdifull og nøyaktig innsikt for diagnostisering og overvåking av synukleinopatier. I et forsøk på å tilby en mer direkte metode for kvantifisering av α-syn-frø, etablerte gruppen vår nylig en ny tilnærming som kombinerer SAA og aggregatspesifikk immunanalyse for å gi en målbar testavlesning som viser vellykket direkte kvantifisering av sådd α-syn i CSF-prøver.28 Selv om denne tilnærmingen robust kvantifiserte SAA-produkter fra PD og DLB med høy spesifisitet og sensitivitet, er den metodiske prosessen som helhet kompleks på grunn av kjøringen av to separate analyser for å generere endelige resultater. Utvikling av en mer forenklet tilnærming som bruker samme konsept ville være av stor verdi.  

Ideen om å innlemme immunanalyse med SAA har blitt videre utforsket av vår egen gruppe og andre. I vårt arbeid har vi fornyet tilnærmingen med å bruke aggregatspesifikk immunanalyse sammen med SAA ved å utvikle en enkelt analyse som effektivt amplifiserer α-syn-frø og kvantifiserer dem samtidig (manuskript innsendt for publisering). Det finnes også forskjellige diagnostiske analyser, nylig utviklet av forskere fra Brigham and Women's Hospital og Wyss Institute for Biologically Inspired Engineering ved Harvard University, referert til som digitale frøamplifiseringsanalyser (dSAAs), som fungerer ved å isolere enkeltstående ⍺-synucleinaggregater i konstruerte mikrorom og dyrkes til større fluorescerende aggregater som blir lett detekterbare og kvantifiserbare.22 

Disse anstrengelsene som fokuserte på å forbedre SAA-er til å være ikke bare kvalitative, men også kvantitative verktøy, som er i stand til å måle mengden sykdomsspesifikke proteinaggregater nøyaktig, er lovende utviklinger som bør støttes ytterligere. Å validere denne utviklingen i større skala kan markere en betydelig milepæl i å integrere den i klinisk praksis og kliniske studier for å oppnå tidlig og nøyaktig diagnose, noe som til slutt forbedrer pasientutfall. 

Professor Outeiro:

Å øke analysens sensitivitet, gjøre SAA-er kvantitative og tilpasse SAA-er til mer tilgjengelige humane biomaterialer ville være viktige utviklingstrekk. For å oppnå dette trenger vi ytterligere forskning for å identifisere analyseforhold og substrater som forbedrer analysen.   

 

Hvordan ser du for deg bruken av SAA-er i fremtidig klinisk praksis og kliniske studier? 

Professor Outeiro:

Jeg ser for meg at SAA-status vil være avgjørende for å klassifisere individer for kliniske studier, og muligens også som en markør for målrettet engasjement. 

Dr. Hattori:

Vi kan si at det først og fremst kan anvendes innen presisjonsmedisin. Det er også mulig å identifisere pasienter med høyere risiko for å utvikle sykdommen ved hjelp av en fysisk undersøkelse av risikogruppen. Som et resultat vil det være nyttig for forebyggende medisin. 

Dr. El-Agnaf og Dr. Abdi:

Etter utvikling og validering av en kvantitativ SAA, kan dens potensielle bruksområder resultere i mer effektive kliniske studier og utvikling av mer effektive, personlige behandlingsstrategier.    

SAA kan muliggjøre deteksjon av PD, DLB og MSA før kliniske symptomer debuterer, noe som gir mulighet for intervensjoner på stadier der behandlinger har større sannsynlighet for å være effektive. Denne tidlige diagnostiske evnen vil ikke bare transformere pasientbehandlingsstrategier, men også forbedre pasientutvelgelseskriteriene for kliniske studier, og sikre at deltakerne får nøyaktig diagnose og er på riktig stadium av sykdomsprogresjonen for at potensielle behandlinger skal ha maksimal effekt. Ved å kvantifisere sykdomsspesifikke proteinaggregater kan SAA-er dessuten tjene som biomarkører for å spore sykdomsprogresjon og respons på behandling, og tilby et dynamisk verktøy for å overvåke pasientens helse over tid. I kliniske studier kan dette dramatisk forbedre evalueringen av terapeutisk effekt, og gi klare, kvantifiserbare endepunkter som gjenspeiler endringer i den underliggende patologien til sykdommen.

 

Referanser

  1. Wilham, JM, Orrú, CD, Bessen, RA, Atarashi, R., Sano, K., Race, B., Meade-White, KD, Taubner, LM, Timmes, A., og Caughey, B. (2010). Rask endepunktskvantifisering av prionsåingsaktivitet med sensitivitet sammenlignbar med bioanalyser. PLoS pathogens, 6(12), e1001217. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1001217 

  1. Atarashi, R., Satoh, K., Sano, K., Fuse, T., Yamaguchi, N., Ishibashi, D., Matsubara, T., Nakagaki, T., Yamanaka, H., Shirabe, S., Yamada, M., Mizusawa, H., Kitamoto, T., McGlade,, G., Klug,, G. J. Nishida, N. (2011). Ultrasensitiv menneskelig priondeteksjon i cerebrospinalvæske ved sanntids skjelving-indusert konvertering. Naturmedisin, 17(2), 175–178. https://doi.org/10.1038/nm.2294 

  1. Fairfoul, G., McGuire, LI, Pal, S., Ironside, JW, Neumann, J., Christie, S., Joachim, C., Esiri, M., Evetts, SG, Rolinski, M., Baig, F., Ruffmann, C., Wade-Martins, R., Hu, MT, Parkkinen, L., og Green, AJ (2016). Alfa-synuklein RT-QuIC i CSF hos pasienter med alfa-synukleinopatier. Annals of clinical and translational neurology, 3(10), 812–818. https://doi.org/10.1002/acn3.338 

  1. Bongianni, M., Ladogana, A., Capaldi, S., Klotz, S., Baiardi, S., Cagnin, A., Perra, D., Fiorini, M., Poleggi, A., Legname, G., Cattaruzza, T., Janes, F., Tabaton, M., Ghetti, S., Monparchi, P., Ghetti, B. Pocchiari, M., & Zanusso, G. (2019). α-Synuclein RT-QuIC-analyse i cerebrospinalvæske hos pasienter med demens med Lewy-kropper. Annals of clinical and translational neurology, 6(10), 2120–2126. https://doi.org/10.1002/acn3.50897 

  1. Rossi, M., Candelise, N., Baiardi, S., Capellari, S., Giannini, G., Orrù, CD, Antelmi, E., Mammana, A., Hughson, AG, Calandra-Buonaura, G., Ladogana, A., Plazzi, G., Cortelli, P., Caughey, B., & Par2020, B.). Ultrasensitiv RT-QuIC-analyse med høy sensitivitet og spesifisitet for Lewy-kroppsassosierte synukleinopatier. Acta neuropathologica, 140(1), 49–62. https://doi.org/10.1007/s00401-020-02160-8 

  1. Brockmann, K., Quadalti, C., Lerche, S., Rossi, M., Wurster, I., Baiardi, S., Roeben, B., Mammana, A., Zimmermann, M., Hauser, AK, Deuschle, C., Schulte, C., Waniek, K., Lachmann, I., Sjödin, S., Brinkmalm, A., Blennow, K., Zetterberg, H., Gasser, T., & Parchi, P. (2021). Sammenheng mellom CSF alfa-synuklein-såaktivitet og genetisk status ved Parkinsons sykdom og demens med Lewy-legemer. Acta neuropathologica communications, 9(1), 175. https://doi.org/10.1186/s40478-021-01276-6 

  1. Poggiolini, I., Gupta, V., Lawton, M., Lee, S., El-Turabi, A., Querejeta-Coma, A., Trenkwalder, C., Sixel-Döring, F., Foubert-Samier, A., Pavy-Le Traon, A., Plazzi, G., Biscarini, J., Mont Gagnoir, J., F. RB, Antelmi, E., Meissner, WG, Mollenhauer, B., Ben-Shlomo, Y., Hu, MT, … Parkkinen, L. (2022). Diagnostisk verdi av kvantifisering av cerebrospinalvæske alfa-synukleinfrø ved synukleinopatier. Brain: et tidsskrift for nevrologi, 145(2), 584–595. https://doi.org/10.1093/brain/awab431 

  1. Kluge, A., Bunk, J., Schaeffer, E., Drobny, A., Xiang, W., Knacke, H., Bub, S., Lückstädt, W., Arnold, P., Lucius, R., Berg, D., og Zunke, F. (2022). Påvisning av nevronavledet patologisk α-synuclein i blod. Brain: a journal of neurology, 145(9), 3058–3071. https://doi.org/10.1093/brain/awac115 

  1. Okuzumi, A., Hatano, T., Matsumoto, G., Nojiri, S., Ueno, SI, Imamichi-Tatano, Y., Kimura, H., Kakuta, S., Kondo, A., Fukuhara, T., Li, Y., Funayama, M., Saiki, S., Taniguchi, D., D. Gérardy, JJ, Mittelbronn, M., Kruger, R., Uchiyama, Y., … Hattori, N. (2023). Propagative α-synukleinfrø som serumbiomarkører for synukleinopatier. Naturmedisin, 29(6), 1448–1455. https://doi.org/10.1038/s41591-023-02358-9 

  1. Simuni, T., Chahine, LM, Poston, K., Brumm, M., Buracchio, T., Campbell, M., Chowdhury, S., Coffey, C., Concha-Marambio, L., Dam, T., DiBiaso, P., Foroud, T., Frasier, M., Gochanour, C., Jennings, D., Kieburtz, K., Kopil, CM, Merchant, K., Mollenhauer, B., Montine, T., … Marek, K. (2024). En biologisk definisjon av neuronal α-synukleinsykdom: mot et integrert stadieinndelingssystem for forskning. The Lancet. Neurology, 23(2), 178–190. https://doi.org/10.1016/S1474-4422(23)00405-2 

  1. Höglinger, GU, Adler, CH, Berg, D., Klein, C., Outeiro, TF, Poewe, W., Postuma, R., Stoessl, AJ, og Lang, AE (2024). En biologisk klassifisering av Parkinsons sykdom: SynNeurGe-forskningens diagnostiske kriterier. The Lancet. Neurology, 23(2), 191–204. https://doi.org/10.1016/S1474-4422(23)00404-0 

  1. Bayer TA. Proteinopatier, et kjernekonsept for å forstå og til syvende og sist behandle degenerative lidelser? Eur Neuropsychopharmacol [Internett]. 2015 1. mai [sitert 2024 18. feb.];25(5):713–24. Tilgjengelig fra: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23642796/ 

  1. McCann H, Stevens CH, Cartwright H, Halliday GM. α-Synukleinopati-fenotyper. Parkinsonisme relatert lidelse. 2014 1. januar;20(SUPPL.1):S62–7. 

  1. Concha-Marambio L, Pritzkow S, Shahnawaz M, Farris CM, Soto C. Frøamplifiseringsanalyse for deteksjon av patologiske alfa-synukleinaggregater i cerebrospinalvæske. Nature Protocols 2023 18:4 [Internett]. 2023. januar 18 [sitert 2023. november 12];18(4):1179–96. Tilgjengelig fra: https://www.nature.com/articles/s41596-022-00787-3 

  1. Shahnawaz M, Tokuda T, Waraga M, Mendez N, Ishii R, Trenkwalder C, et al. Utvikling av en biokjemisk diagnose av Parkinsons sykdom ved påvisning av α-synuklein feilfoldede aggregater i cerebrospinalvæske. JAMA Neurol [Internett]. 2017 1. feb. [sitert 2023 24. sep.];74(2):163–72. Tilgjengelig fra: https://jamanetwork.com/journals/jamaneurology/fullarticle/2588684 

  1. Shahnawaz M, Mukherjee A, Pritzkow S, Mendez N, Rabadia P, Liu X, et al. Diskriminerende α-synukleinstammer ved Parkinsons sykdom og multippel systematrofi. Nature [Internett]. 2020 13. feb. [sitert 2023 23. nov.];578(7794):273–7. Tilgjengelig fra: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32025029/ 

  1. El-Agnaf OMA, Salem SA, Paleologou KE, Cooper LJ, Fullwood NJ, Gibson MJ, et al. α-Synuklein involvert i Parkinsons sykdom finnes i ekstracellulære biologiske væsker, inkludert humant plasma. The FASEB Journal [Internett]. 2003 1. oktober [sitert 2024 18. februar];17(13):1–16. Tilgjengelig fra: https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1096/fj.03-0098fje 

  1. Kuzkina A, Bargar C, Schmitt D, Rößle J, Wang W, Schubert AL, et al. Diagnostisk verdi av hud-RT-QuIC ved Parkinsons sykdom: en tolaboratoriestudie. npj Parkinson's Disease 2021 7:1 [Internett]. 2021 15. nov. [sitert 2023 22. nov.];7(1):1–11. Tilgjengelig fra: https://www.nature.com/articles/s41531-021-00242-2 

  1. De Luca CMG, Elia AE, Portaleone SM, Cazzaniga FA, Rossi M, Bistaffa E, et al. Effektiv RT-QuIC-såingsaktivitet for α-synuklein i lukteslimhinneprøver fra pasienter med Parkinsons sykdom og multippel systematrofi. Transl Neurodegener [Internett]. 2019. august 8 [sitert 2023. november 22];8(1):1–14. Tilgjengelig fra: https://translationalneurodegeneration.biomedcentral.com/articles/10.1186/s40035-019-0164-x 

  1. Mayo Clinic. Parkinsons test (α-Synuclein seed amplification assay) - Mayo Clinic [Internett]. 2023 [sitert 2024. februar 18]. Tilgjengelig fra: https://www.mayoclinic.org/tests-procedures/parkinsons-testing-alpha-synuclein-seed-amplification/about/pac-20556191 

  1. Siderowf A, Concha-Marambio L, Lafontant DE, Farris CM, Ma Y, Urenia PA, Nguyen H, Alcalay RN, Chahine LM, Foroud T, Galasko D, Kieburtz K, Merchant K, Mollenhauer B, Poston KL, Seibyl J, Simuni T, Tanner CM, Weintraub D, Videnovic A, Choi SH, Kurth R, Caspell-Garcia C, Coffey CS, Frasier M, Oliveira LMA, Hutten SJ, Sherer T, Marek K, Soto C; Parkinson's Progression Markers Initiative. Vurdering av heterogenitet blant deltakere i Parkinson's Progression Markers Initiative-kohorten ved bruk av α-synuclein-frøamplifisering: en tverrsnittsstudie. Lancet Neurol. Mai 2023;22(5):407-417. doi: 10.1016/S1474-4422(23)00109-6. PMID: 37059509; PMCID: PMC10627170. 

  1. Gilboa T, Swank Z, Thakur R, Gould RA, Ooi KH, Norman M, et al. Mot kvantifisering av α-synukleinaggregater med digitale frøamplifikasjonsanalyser. Proc Natl Acad Sci USA [Internett]. 2024 16. januar [sitert 2024 18. februar];121(3). Tilgjengelig fra: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38194461/ 

  1. Postuma RB. Prodromal Parkinsons sykdom – Bruk av REM-søvnforstyrrelse som et vindu. Parkinsonisme relatert lidelse. 2014 1. januar;20(SUPPL.1):S1–4. 

  1. Concha-Marambio L, Weber S, Farris CM, Dakna M, Lang E, Wicke T, et al. Nøyaktig deteksjon av α-synukleinfrø i cerebrospinalvæske fra isolert Rapid Eye Movement Sleep Behavior Disorder og pasienter med Parkinsons sykdom i DeNovo Parkinson (DeNoPa)-kohorten. Mov Disord [Internett]. 2023. april 1 [sitert 2024. februar 18];38(4):567–78. Tilgjengelig fra: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36781413/ 

  1. Fernandes Gomes B, Farris CM, Ma Y, Concha-Marambio L, Lebovitz R, Nellgård B, et al. α-Synuklein-frøamplifiseringsanalyse som et diagnostisk verktøy for parkinsonske lidelser. Parkinsonism Relat Disord [Internett]. 2023. desember 1 [sitert 2024. februar 19];117. Tilgjengelig fra: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/37591709/ 

  1. Iranzo A, Fairfoul G, Ayudhaya ACN, Serradell M, Gelpi E, Vilaseca I, et al. Påvisning av α-synuclein i CSF ved RT-QuIC hos pasienter med isolert søvnforstyrrelse med raske øyebevegelser: en longitudinell observasjonsstudie. Lancet Neurol [Internett]. 2021. mars 1 [sitert 2023. september 24];20(3):203–12. Tilgjengelig fra: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33609478/ 

  1. Manne S, Kondru N, Jin H, Anantharam V, Huang X, Kanthasamy A, et al. α-Synuclein sanntids skjelv-indusert konvertering i submandibulære kjertler hos pasienter med Parkinsons sykdom. Mov Disord [Internett]. 2020 1. feb. [sitert 2023 22. nov.];35(2):268–78. Tilgjengelig fra: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31758740/ 

  1. Majbour N, Aasly J, Abdi I, Ghanem S, Erskine D, Van De Berg W, et al. Sykdomsassosierte α-Synukleinaggregater som biomarkører for Parkinsons sykdoms kliniske stadium. Nevrologi [Internett]. 2022. november 22 [sitert 2023. juni 11];99(21):E2417–27. Tilgjengelig fra: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36096686/